Zum Phosphatstoffwechsel von Mykobakterien

Zusammenfassung1. Es wird versucht, durch Ausnutzung der unter Bedingungen endogener Atmung ablaufenden Stoffwechselprozesse eine Markierung von Mykobakterien mit P32 vorzunehmen.2. Es wird der Einfluß der Inkubationszeit auf den P32-Einbau untersucht. 24 h sind für die Markierung ausreichend. Bei längeren Inkubationszeiten werden zwar höhere spezifische Aktivitäten erreicht, die Ausbeute wird aber durch auto-lytische Prozesse vermindert.3. Durch Einsatz von Fermentinhibitoren läßt sich nachweisen, daß für den Einbau ein intakter Stoffwechsel notwendig ist.4. Von der eingebauten P32-Aktivität wurden nach der Fraktionierung etwa 35% in der säurelöslichen und 60% in der Nukleinsäure-Fraktion gefunden.5. Die Einbaurate wächst proportional der vorgelegten P32-Menge. Nach 24 h sind ungefähr 78% eingebaut, 10% verbleiben im Suspensionsmedium und ~ 0,5% werden mit dem Waschwasser ausgewaschen. Der Rest entzieht sich wahrscheinlich durch Adsorptionseffekte dem Nachweis.6. Die Vorteile dieses Verfahrens für eine rationelle Markierung von Mykobakterien werden diskutiert. Die einzusetzende P32-Menge läßt sich für jede Problemstellung und für die gewünschte Impulsrate berechnen.