Polarization of Hepatic Macrophages by HBsAg : a means to an end for viral maintenance

La polarisation des macrophages hépatique par HBsAg comme moyen de maintenance virale Les macrophages hépatiques sont impliqués à la fois dans des mécanismes de tolérances et de clairances des pathogènes. Afin de mieux comprendre leur rôle dans les infections chroniques du Virus de l’Hépatite B (VHB) et de l’Hépatite Delta (VHD), nous avons caractérisé phénotypiquement l’interaction existant in vivo et ex vivo entre le VHB et macrophages primaires humains (MPH) ou des monocytes primaires, différentiés en macrophages pro- ou anti-inflammatoires (M1-MDMs ou M2-MDMs respectivement). Les MPH ou MDMs ont été exposé à différents génotypes du VHB et leur activation a été étudié par ELISA ou RT-qPCR. Des biopsies hépatiques de patient chroniquement infectés par le VHB ont été analysé par RT-qPCR ou immunohistochimie. Les paramètres viraux du VHB et VHD dans des Hépatocytes Primaires Humains (HPH) et des HepaRG différentiées ont été suivi par ELISA, qPCR ou RT-qPCR. Dans des biopsies hépatiques de patients VHB, nous avons montré la présence de la protéine de capside du VHB (HBc) au contact des macrophages, associé à une augmentation des marques anti-inflammatoires de ces derniers. L’exposition ex vivo de PLMs au VHB entraine une diminution de leurs sécrétions de cytokines pro-inflammatoires. L’incubation de MDMs avec le VHB de génotype C et D entraine une diminution des sécrétions pro-inflammatoires des M1-MDMs (IL-6 et IL-1β) ainsi qu’une augmentation des cytokines anti-inflammatoires chez les M2-MDMs exposés au VHB-B, C et D. Des expériences de cocultures nous ont par la suite permis d’identifier la protéine d’enveloppe du VHB (HBsAg) comme étant la principale actrice des modulations observées. Le VHB et le VHD partageant la même protéine d’enveloppe, des modifications similaires sont observées en présence de virions de VHD. Aussi, nous avons montré que les cytokines produites par les M1-MDMs sont capable de diminuer l’établissement de l’infection VHB dans les hépatocytes, mais pas celles qui sont produites par des M1-MDMs exposés au VHB. De plus, une forte diminution dose dépendante de la maintenance des ARNs du VHB (génotype A à E) ainsi que du VHD a été observé dans des hépatocytes infectés, suite à un traitement avec de l’IL-1β recombinante. Cette inhibition semble dépendante de l’activation de la voie NFkB et impliquer, au moins en partie, la déstabilisation des ARNs viraux. En conclusion, nos données suggèrent que le VHB module les fonctions des macrophages hépatiques pour favoriser son établissement et sa persistance.