The role of a cryptic furin-like cleavage site on Ebola virus replication

Le rôle d'un site de clivage cryptique similaire à la furine sur la réplication du virus Ebola La glycoprotéine de surface GP du virus Ebola joue un rôle crucial dans la facilitation de l'entrée du virus dans les cellules hôtes, bien que le mécanisme sous-jacent à ce processus ne soit que partiellement compris. Dans des expériences précédentes de dépistage de médicaments, nous avons identifié un composé anionique qui inhibe efficacement la propagation du virus Ebola. Des investigations supplémentaires en utilisant un virus stomatite vésiculaire recombinant (VSV) exprimant la GP de surface du virus Ebola nous ont permis d'identifier une seule mutation d'acide aminé à la position 304 (E304A) qui conférait une résistance à l'inhibiteur. Dans cette étude, nous avons cherché à élucider les mécanismes moléculaires sous-jacents à cette résistance. Nous avons découvert que le VSV recombinant portant la mutation E304Aprésentait un avantage de croissance par rapport au virus sauvage, même en l'absence de l'inhibiteur, et que cet avantage était associé à une augmentation de l'efficacité d'entrée du virus. Des analyses supplémentaires ont révélé que la mutation entraînait un changement dans le motif de clivage de la sous-unité GP1, conduisant à la perte d'un domaine de type mucine et à une augmentation de l'efficacité d'entrée du virus. Nous avons également observé que les virus sauvages et mutants possédaient deux formes de la GP de surface, une GP1 à longueur totale et sa version clivée, mais dans des ratios différents. Cette corrélation entre le clivage de GP1 et l'infectivité du virus a été confirmée en utilisant des virus générés par VSV avec des mutations perturbant les sites de clivage putatifs. Enfin, nous avons complété nos études en utilisant des virus Ebola recombinants portant soit la GP sauvage, soit la mutation E304A. Nos résultats ont montré que la mutation entraînait également le clivage de GP1 dans les virus Ebola vivants, ce qui entraînait une infectivité accrue et des plaques de plus grande taille. Dans l'ensemble, nos découvertes suggèrent un nouveau modèle de la biologie du virus Ebola qui met en évidence la flexibilité de la GP et de ses motifs de clivage, avec des implications potentielles pour le développement de médicaments.