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Clonagem in vitro de genótipos adultos de macaúba (Acrocomia aculeata (Jacq.) Lodd. ex Martins) via embriogênese somática
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A macaúba (Acrocomia aculeata) é uma palmeira nativa com grande potencial econômico. O presente trabalho teve como objetivo estabelecer um protocolo eficiente para a clonagem de macaúba, a partir de folhas imaturas de plantas adultas altamente produtivas em óleo e a caracterização anatômica e histoquímica dos calos embriogênicos formados. Foram utilizados 12 materiais genéticos oriundos do município de Araponga-MG e 1 material genético oriundo da empresa Acrotech localizada no município de Viçosa, MG, Brasil. Explantes foliares desses 13 genótipos foram inoculados em meio de indução contendo sais Y3 e H (Hoagland), com concentrações 180, 270, 360, 450, 540, 630 e 720 µM de picloram. Perfazendo um fatorial triplo, formando ao final 182 combinações. Foi realizado 20 repetições por combinação totalizando 3640 unidades experimentais, sendo que cada unidade experimental era composta por cada placa de Petri contendo 5 explante. Foi avaliado o número de explantes calejados e oxidados e realizado a caracterização anatômica e histoquímica dos calos. Os calos obtidos da indução foram submetidos a meios básicos de multiplicação com sais Y3-modificado e C4 com concentrações de 18 e 63 μM de picloram com 1,0 e 2,0 μM de 2iP, respectivamente, e 630 µM de picloram com 10 μM de 2iP, utilizando carvão 3g L -1. Todos os meios testados foram acrescidos de sacarose 20 g L-1, suplementados com 1000 μM de putrescina. A massas embriogênicas obtidas dessa etapa foram submetidas ao meio de regeneração C4, com ausência de picloram acrescido 1000 μM de putrescina e 0,1 μM de 2iP. Os embriões obtidos foram inoculados em meio de geminação C4, suplementados com 0,54 μM de ANA e 1000 μM de putrescina, onde regeneraram plântulas. O meio Y3 foi mais eficiente na formação de calos embriogênicos. O meio C4 foi o mais eficiente nas etapas de multiplicação, regeneração e germinação. A dose de 450 μM de picloram foi a que resultou em maior número de explantes calejados. A dose de 630 μM de picloram foi a que resultou menor número de explantes calejados. Contudo, essa dose foi a que proporcionou calos diferenciados quando inoculados em meio de multiplicação, regeneração e germinação, com consequente conversão em plântulas. A formação de estruturas pró-embriogênicas se inicia a partir da reativação de células associadas as nervuras foliares dos explantes. As pectinas, polissacarídeos neutros e grãos de amido são diferencialmente distribuídos nos tecidos vegetais ao longo do processo de indução de embriogênese somática. A presença de amido e pectinas nas adjacências dos centros meristemáticos pode estar vinculado à aquisição de potencial embriogênico. Palavras-chave: Arecaceae. Regeneração in vitro. Cultura de Tecidos.
Title: Clonagem in vitro de genótipos adultos de macaúba (Acrocomia aculeata (Jacq.) Lodd. ex Martins) via embriogênese somática
Description:
A macaúba (Acrocomia aculeata) é uma palmeira nativa com grande potencial econômico.
O presente trabalho teve como objetivo estabelecer um protocolo eficiente para a clonagem de macaúba, a partir de folhas imaturas de plantas adultas altamente produtivas em óleo e a caracterização anatômica e histoquímica dos calos embriogênicos formados.
Foram utilizados 12 materiais genéticos oriundos do município de Araponga-MG e 1 material genético oriundo da empresa Acrotech localizada no município de Viçosa, MG, Brasil.
Explantes foliares desses 13 genótipos foram inoculados em meio de indução contendo sais Y3 e H (Hoagland), com concentrações 180, 270, 360, 450, 540, 630 e 720 µM de picloram.
Perfazendo um fatorial triplo, formando ao final 182 combinações.
Foi realizado 20 repetições por combinação totalizando 3640 unidades experimentais, sendo que cada unidade experimental era composta por cada placa de Petri contendo 5 explante.
Foi avaliado o número de explantes calejados e oxidados e realizado a caracterização anatômica e histoquímica dos calos.
Os calos obtidos da indução foram submetidos a meios básicos de multiplicação com sais Y3-modificado e C4 com concentrações de 18 e 63 μM de picloram com 1,0 e 2,0 μM de 2iP, respectivamente, e 630 µM de picloram com 10 μM de 2iP, utilizando carvão 3g L -1.
Todos os meios testados foram acrescidos de sacarose 20 g L-1, suplementados com 1000 μM de putrescina.
A massas embriogênicas obtidas dessa etapa foram submetidas ao meio de regeneração C4, com ausência de picloram acrescido 1000 μM de putrescina e 0,1 μM de 2iP.
Os embriões obtidos foram inoculados em meio de geminação C4, suplementados com 0,54 μM de ANA e 1000 μM de putrescina, onde regeneraram plântulas.
O meio Y3 foi mais eficiente na formação de calos embriogênicos.
O meio C4 foi o mais eficiente nas etapas de multiplicação, regeneração e germinação.
A dose de 450 μM de picloram foi a que resultou em maior número de explantes calejados.
A dose de 630 μM de picloram foi a que resultou menor número de explantes calejados.
Contudo, essa dose foi a que proporcionou calos diferenciados quando inoculados em meio de multiplicação, regeneração e germinação, com consequente conversão em plântulas.
A formação de estruturas pró-embriogênicas se inicia a partir da reativação de células associadas as nervuras foliares dos explantes.
As pectinas, polissacarídeos neutros e grãos de amido são diferencialmente distribuídos nos tecidos vegetais ao longo do processo de indução de embriogênese somática.
A presença de amido e pectinas nas adjacências dos centros meristemáticos pode estar vinculado à aquisição de potencial embriogênico.
Palavras-chave: Arecaceae.
Regeneração in vitro.
Cultura de Tecidos.
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