Targeting Kinases : A Strategic Approach to Mitigate TNF-Induced Necroptosis

Ciblage de kinases : une approche stratégique pour atténuer la nécroptose induite par le TNF La nécroptose est une forme de mort cellulaire génétiquement régulée qui se caractérise par la libération de cytokines, de chimiokines et de motifs moléculaires associés aux dommages, ce qui provoque une inflammation. Ce type de mort cellulaire est impliqué dans divers troubles pathologiques, notamment les maladies neurodégénératives et cardiovasculaires. Parmi les différents modulateurs de la nécroptose induite par le facteur de nécrose tumorale (TNF) figure la protéine kinase 1 (RIPK1) qui interagit avec les récepteurs de la sérine/thréonine. Malgré de nombreux essais cliniques visant à inhiber RIPK1, aucun inhibiteur efficace de la nécroptose n'a été traduit avec succès dans la pratique clinique. Par conséquent, nous avons pensé qu'il pourrait exister d'autres cibles moléculaires et que la réorientation des médicaments pourrait fournir des stratégies thérapeutiques alternatives pour la gestion de la nécroptose. Nous avons effectué un criblage à haut débit de 2861 composés (1600 médicaments approuvés par la FDA) afin d'évaluer leurs effets modulateurs sur la nécroptose induite par le TNF dans les cellules L929. Le criblage secondaire a validé 151 composés qui modulaient de manière significative la nécroptose induite par le TNF, parmi lesquels le Pamoate de Pyrvinium (PyrPam), un médicament approuvé par la FDA, a suscité notre intérêt. Le PyrPam est un activateur de la caséine kinase 1 (CK1) qui favorise la nécroptose de manière significative par rapport aux cellules traitées au TNF, ce qui nous a amenés à nous concentrer sur le rôle de la CK1 dans la nécroptose. Nous avons constaté que des études antérieures ont indiqué que l'inhibition de la CK1 peut atténuer la nécroptose dans des modèles cellulaires murins et humains en inhibant la phosphorylation de RIPK3 à la sérine 227, ce qui bloque la nécroptose. Cependant, l'étude dose-réponse a révélé que le PyrPam réduit la nécroptose tandis que l'Epiblastine A (inhibiteur de CK1) réduit également la nécroptose dans les cellules L929. Nous avons étudié la dynamique de signalisation de la CK1 au niveau de la cellule unique à l'aide d'un biocapteur basé sur le FRET, qui a révélé que l'activité de la CK1 était différentielle entre la survie cellulaire et la nécroptose. L'augmentation précoce et brutale de l'activité de la CK1 suggère potentiellement son implication dans la nécroptose induite par le TNF. Il est important de souligner que l'activité de la CK1 pourrait être dispensable pour les cellules L929. Cependant, des recherches supplémentaires sont nécessaires pour délimiter les mécanismes précis par lesquels l'activité de la CK1 est compensée (s'il y en a) par d'autres voies, qui soutiennent sa viabilité dans ce contexte.