Modulations de la P-glycoprotéine et variabilité pharmacocinétique des médicaments : mise au point d’approches in-vitro

Les transporteurs d’efflux jouent un rôle clé dans la pharmacocinétique des médicaments et sont impliqués dans de nombreuses variabilités intra-et inter-individuelles. Ainsi, plusieurs modèles in-vitro de barrière ont été validés comme standards pour prédire le transport des médicaments, leur application reste cependant limitée aux interactions et concernent principalement des modèles d’absorption. De ce fait, l’objectif de ce travail de thèse consistait principalement à caractériser un modèle in-vitro de barrière rénale appliqué à l’étude du transport des médicaments et de ses modulations. La première étude était axée sur la caractérisation pharmacologique de la lignée rénale humaine RPTEC/TERT1. Ce modèle présentait les principaux critères d’un modèle de barrière rénale. L’étanchéité du modèle, les perméabilités membranaires ainsi que l’expression des transporteurs d’efflux ont été validés. Cependant, seule la fonctionnalité de P-gp a été clairement établie dans notre étude, limitant son application à l’étude de ce transporteur. La seconde étude a donc permis d’évaluer l’application du modèle RPTEC/TERT1 à des études d’interactions médicamenteuses liées à la P-gp rénale. L’évaluation du potentiel inhibiteur de médicaments connus pour interagir ou non avec la P-gp, en utilisant un substrat spécifique, a ainsi permis de considérer le modèle pour étudier le transport rénal des médicaments médié par la P-gp. Par ailleurs, une comparaison des IC50 estimés au sein du modèle rénal avec le modèle de référence Caco-2 a révélé l’intérêt de développer des modèles humains plus physiologiques pour améliorer l’extrapolation des données à l’in-vivo. Enfin, après avoir démontré la pertinence du modèle RPTEC/TERT1, la troisième étude visait à étudier l’impact de l’inflammation sur l’expression et l’activité de P-gp en exposant les cellules à des cytokines pro-inflammatoires. La barrière intestinale était également évaluée ici en utilisant le modèle Caco-2. Dans notre étude, des effets opposés ont été observés entre le TNF-α et l'IL-1β qui ont induit respectivement, une induction et une répression de la P-gp. Enfin, nous avons pour la première fois exposé les cellules RPTEC/TERT1 et Caco-2 à des plasmas de patients inflammatoires. Une approche originale qui a mis en évidence une répression de l’expression et de l’activité de P-gp. Finalement, ce travail a permis de considérer le modèle RPTEC/TERT1 comme outil pertinent pour étudier l’efflux rénal des médicaments mais a aussi ouvert la voie à de nouvelles approches in-vitro.