The Senescence Marker p16 in Development, Adulthood, and Aging

Le marqueur de sénescence p16Ink4a dans le développement, l'âge adulte et le vieillissement Le vieillissement est une caractéristique biologique qui se caractérise par une dégénérescence progressive de la fonction des cellules, des tissus, des organes ou d'un organisme intact en raison de l'accumulation de facteurs environnementaux et de stress avec le temps. Plusieurs facteurs ont été attribués au vieillissement tels que le stress oxydatif, le raccourcissement des télomères, les dommages à l'ADN et surtout, le dépôt de cellules sénescentes. Ce sont des cellules irréversiblement mitotiquement inactives, mais métaboliquement actives. La raison sous-jacente à leur sénescence réside dans les bras extrinsèques et intrinsèques. Le bras extrinsèque est principalement caractérisé par l'expression et le profil sécrétoire connu sous le nom de phénotype sécrétoire associé à la sénescence (SASP). Le bras intrinsèque résulte de l'impact de plusieurs gènes censés réguler le cycle cellulaire, tels que les gènes suppresseurs de tumeurs p16Ink4a (p16), p19ARF (p19) et p21. P16 est un suppresseur de tumeur et un régulateur du cycle cellulaire qui a été lié au vieillissement et à la sénescence. Des recherches approfondies ont révélé que l'expression de p16 est significativement augmentée dans les cellules sénescentes, ainsi que lors du vieillissement naturel ou de pathologies liées à l'âge. De ce fait, p16 est considéré comme un biomarqueur spécifique pour détecter les cellules sénescentes et le vieillissement. Alors qu'un rôle potentiel de p19 et p21 a été démontré dans le développement embryonnaire, p16 a été moins bien documenté. Pour étudier le rôle potentiel de p16 dans le développement, nous avons mené une étude d'expression développementale de p16, à côté des suppresseurs de tumeurs p19ARF et p21, et examiné leur expression d'ARN dans le cerveau, le cœur, le foie et les reins de souris au stade embryonnaire, postnatal, adulte et les vieux âges. L'immunohistochimie a été utilisée pour examiner l'expression de P16 au niveau de la protéine. Nous avons constaté que l'expression de p16 était très dynamique dans tous les organes au cours des stades embryonnaire et postnatal, et qu'elle était significativement plus élevée chez les souris âgées par rapport à p19 et p21. De plus, nous avons constaté que l'ARNm et la protéine p16 étaient plus répandus dans les cellules endothéliales hépatiques (CE) que les cellules parenchymateuses chez les souris âgées. Ces découvertes indiquent un rôle possible de p16 dans le développement embryonnaire, ainsi qu'un rôle sélectif potentiel de p16 dans les CE hépatiques.Par conséquent, nous avons cherché à mieux comprendre le rôle de p16 dans les processus biologiques des CE hépatiques. Par conséquent, nous avons utilisé de petites constructions en épingle à cheveux (shRNA) et un vecteur ADNc-GFP p16 transduit via un lentivirus, pour inhiber et surexprimer p16 in vitro, afin d'évaluer la perte et le gain de fonction dans deux types de foie. ECs, ECs vasculaires CD31+ et cellules endothéliales sinusoïdales CD146+ (LSEC). Les cellules ont été isolées du foie par un test de tri magnétique des cellules activées (MACS) à l'aide d'anticorps monoclonaux attachés à des billes magnétiques contre les marqueurs de surface CD31 et CD146. Une séquence non codante et des cellules transduites par un vecteur GFP vide ont été utilisées comme contrôle pour les cellules transduites par shRNA et p16-GFP, respectivement.