Immunomodulation des lymphocytes Vγ9Vδ2 dans les leucémies aigües

Chez l’adulte, les leucémies aigües (LA) myéloïde (LAM) ou lymphoblastique (LAL) représentent respectivement 80% et 20% des LA et sont associées à un mauvais pronostic avec une survie globale d’environ 30 à 40%. Les immunothérapies qui sont approuvées dans les LA concernent l’allogreffe de cellules souches hématopoïétiques (HSCT) et plus récemment, les CAR-T cells ou les anticorps bispécifiques dans les LAL. La plupart des stratégies d’immunothérapie en développement reposent sur la modulation d’effecteurs cytotoxiques, comme les lymphocytes T (LT) cytotoxiques TCD8+ ou les cellules NK, qui montrent pour le moment des résultats limités. Une meilleure connaissance du microenvironnement immunitaire dans la LAM et dans la LAL, a permis de montrer qu’elles sont toutes deux la cible des LT γδ (Tγδ).Les Tγδ combinent des caractéristiques adaptatives et innées. Des analyses transcriptomiques de plusieurs milliers d’échantillons tumoraux ont montré qu’une infiltration plus importante en Tγδ avait la meilleure valeur pronostique. Les T γδ représentent 1 à 10 % des lymphocytes T (LT) périphériques et sont composés majoritairement de Vγ9Vδ2, dont l’activation repose sur la reconnaissance de phosphoantigènes et fait aussi intervenir les molécules BTN3A, cibles d’un ACm (AC monoclonal) agoniste (ICT01), actuellement évalué dans un essai de phase 1/2. Néanmoins, le mécanisme d’activation précis des Vγ9Vδ2 reste inconnu, tout autant que les déterminants qui modulent leurs fonctions, notamment dans les LA. Par ailleurs, la majorité des données pronostiques portant sur les Tγδ concernent la période post-HSCT et la plupart des essais concernent la modulation de Tγδ allogéniques.Dans les LA, le rôle des Tγδ au diagnostic et les possibilités d’immunothérapie autologue ont donc été sous-évaluées.Mon travail de thèse s’est focalisé sur 3 axes :1-Rôle pronostique et fonctions des Vγ9Vδ2 au diagnosticNous avons pu analyser l’impact pronostique des altérations des Tγδ, en utilisant les données issues de 4 cohortes de LAM nouvellement diagnostiquées (ND) analysées dans le laboratoire (n= 198). Nous avons mis en évidence un impact délétère de fréquences faibles en Vγ9Vδ2 sur la survie, ces dernières étaient associées à des altérations phénotypiques des Vγ9Vδ2 et à une baisse du niveau d’expression de BTN3A à la surface des blastes.Nous avons également pu analyser l’impact pronostique des altérations des Tγδ, en utilisant les données d’une cohorte de 28 patients atteints de LAL ND. En comparant les patients qui vont rester en rémission complète (RC) à ceux qui vont rechuter (REL), des analyses non supervisées ont révélé des altérations communes entre les T CD8+ et les T ɣδ des patients REL. Nous avons également démontré que la signature immunophénotypique des Tγδ était la plus discriminante entre les deux groupes, et plus particulièrement celle des Vγ9Vδ2.Qu’il s’agisse de Vγ9Vδ2 issus de patients LAM ou LAL, nous sommes parvenus à les expandre et à les faire dégranuler quel que soit le groupe pronostique.2-Rôle des molécules BNT2A et BTN3A dans les LANous avons analysé la contribution respective de la molécule BTN2A ainsi que celle de BTN3A dans la cytotoxicité de blastes myéloïdes et lymphoïdes, issus de lignées et de cellules primaires. Dans le cadre d’une collaboration avec Imcheck Therapeutics, nous avons également analysé l’activité in vitro et in vivo d’un nouvel ACm anti-BTN2A1 agoniste, le 107G3B5.3- Pharmacomodulation des Vγ9Vδ2 dans les LAPlusieurs drogues ont été étudiées pour leurs capacités à moduler les fonctions des Vγ9Vδ2 dans les LA. Mon projet a notamment porté sur les effets d’une combinaison venetoclax-azacitidine et ICT01, qui a permis d’augmenter la cytotoxicité de Vγ9Vδ2 contre des blastes de LAM.A la fois dans la LAL comme dans la LAM, nous avons pu montrer que les Vγ9Vδ2 avaient un impact pronostique important et qu’il était possible de les immunomoduler dans le cadre d’une stratégie autologue.