Myogenic precursor cell impairment in dermatomyositis and other myositis

Etude des cellules souches musculaires dans la dermatomyosite et les autres myosites Les myopathies inflammatoires idiopathiques (MII) constituent un groupe hétérogène de maladies musculaires acquises. Parmi elles, la dermatomyosite (DM) est la plus fréquente, survenant à tous les âges de la vie, et pouvant engager le pronostic vital. Le diagnostic repose sur l'association d'une faiblesse musculaire, d'infiltrats inflammatoires sur la biopsie musculaire et d'auto-anticorps dans le sérum. La pathogenèse apparaît multifactorielle, avec de nombreuses études concentrées sur l'immunité adaptative, et reste à ce jour incomplètement comprise. Dans le muscle de DM, la régénération ne compense pas la nécrose, et ceci induit une évolution chronique. Néanmoins, la capacité de régénération musculaire a été très peu étudiée dans ces pathologies. Dans le muscle normal, la régénération du muscle lésé se fait par un processus de myogenèse initié par les cellules souches musculaires (CSM) et permet une réparation ad integrum du tissu lésé. L’objectif de ce projet est d'évaluer la capacité des CSM dérivés de DM à réaliser le processus de myogenèse. Patients et méthodes : Une sélection de patients DM (sévère [n = 5] et légère [n = 3]) et des contrôles sains (CT [n = 5]) (appariés sexe et âge) a été effectuée dans la base de données des Hospices Civils de Lyon dont les échantillons étaient disponibles en biobanque. Une étude complémentaire a été réalisés sur d’autres patients IIM : myopathie nécrosante auto-immune (MNAI) (n = 3), myosite à inclusions (IBM) (n = 3) et syndrome des anti-synthétases (SAS) (n = 3). La myogenèse a été explorée in vitro par la culture de CSM pour l'évaluation de leur prolifération, de leur différenciation en myocytes et la fusion des myocytes en myotubes. La prolifération a été évaluée par incorporation d'un analogue de la thymidine dans l'ADN. La différenciation myogénique terminale a été évaluée par l'expression cellulaire de la myogénine. La fusion cellulaire a été quantifiée comme le nombre de noyaux incorporés dans les myotubes. L’étude de la sénescence a été faite par cytométrie en flux avec un substrat fluorescent de SA-βGalactosidase, marqueur spécifique de la sénescence. Enfin, l’impact de l'inhibition de la signalisation interféron sur la myogénèse in vitro a été évalué avec un inhibiteur des kinases JAK et un anticorps bloquant. Résultats : La prolifération des CSM de DM est significativement plus faible que celle des CSM de CT (p = 0,0020). La différenciation myogénique terminale est également très altérée dans les CSM de DM sévères, et à moindre niveau dans les cellules de DM légères (p = 0,001). La fusion est significativement diminuée dans les DM avec une diminution majeure pour les DM sévères et à un degré moindre pour les CSM de DM légères (p <0,0001 pour chacun). Ces résultats ont été reproduits pour les autres IIM, sauf les ASS. Grâce à des investigations cellulaires et moléculaires complémentaires, nous avons trouvé une sénescence accrue dans les CSM de DM in vitro, et une implication potentielle de l'interféron de type I dans l'altération de la myogenèse. En effet, la myogenèse des CSM de DM a été améliorée voire restaurée par l’adjonction des inhibiteurs de la signalisation interféron. Conclusions : Ces résultats montrent que la régénération du muscle squelettique est altérée dans la DM en raison de la capacité altérée des CSM à réaliser le processus de myogenèse. Cela peut expliquer en partie les altérations musculaires et la faiblesse musculaire observées chez les patients Ces résultats soutiennent l'hypothèse d'altérations intrinsèques des propriétés des CSM dans la DM, potentiellement liées à la voie de l'interféron et participant à la pathogenèse de la maladie