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Pesquisa de tripanossomatídeos em carrapatos da região do Distrito Federal

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Tripanossomatídeos são protozoários flagelados pertencentes à família Trypanosomatidae daqual se destacam os gêneros Leishmania e Trypanosoma por apresentarem exemplaresresponsáveis pelo desenvolvimento de doenças tropicais negligenciadas de grandeimportância para a saúde pública. No Brasil, a Leishmaniose e a Doença de Chagas sãocausadas por protozoários dessa família, Leishmania spp. e Trypanosoma cruzi,respectivamente, sendo que ambas são transmitidas ao ser humano por insetoshematófagos. Embora a Leishmania spp. seja transmitida por flebotomíneos e oTrypanosoma cruzi por triatomíneos, os carrapatos vêm sendo estudados a fim de verificar opossível envolvimento desses artrópodes no ciclo de transmissão de agentes da famíliaTrypanosomatidae, uma vez que também realizam repasto sanguíneo. Dessa forma, apresente pesquisa teve como objetivo geral verificar a ocorrência de protozoários da famíliaTrypanosomatidae em carrapatos encontrados em capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) devida livre do Distrito Federal (DF) e como objetivos específicos identificar as espécies doscarrapatos coletados e determinar através de métodos moleculares a existência detripanossomatídeos nesses artrópodes. As amostras de carrapatos utilizadas no presenteestudo foram coletadas a partir de capivaras de vida livre capturadas em áreas recreativas doDF em estudo sanitário prévio realizado entre os anos de 2017 e 2019. Os carrapatos foramremovidos diretamente do tecido cutâneo das capivaras e submetidos à extração de DNAcom a utilização de isotiocianato de guanidina e fenol clorofórmio. Para a detecção deagentes da família Trypanosomatidae, as amostras de DNA foram submetidas à cPCRutilizando os oligonucleotídeos D75 (5’- GCA GAT CTT GGT TGG CGT AG -3’) e D76 (5’- CGTTCT CTG TTG CCC CTT TT -3’). Os produtos de amplificação de todas as reações de cPCRforam separados por eletroforese em gel de agarose 2%, corados em brometo de etídio(Vetec Sigma-Aldrich®, St Louis, MO) e visualizados sob luz ultravioleta (UV transiluminator®,UVP LLC, Upland,32 CA). Foram amostrados 558 carrapatos provenientes de 57 capivaras,sendo que do número total de carrapatos coletados cerca de 69.3% foi identificado comoAmblyomma dubitatum, 29% como Amblyomma sculptum e 1.6% como Amblyomma spp..Das 229 amostras de DNA testadas para agentes da família Trypanosomatidae, 7 deramresultado positivo após a cPCR, sendo que 5 eram da espécie A. sculptum (3 fêmeas adultas e2 machos adultos) e 2 eram da espécie A. dubitatum (1 ninfa e 1 macho adulto). Osresultados da presente pesquisa evidenciam a presença de agentes da famíliaTrypanosomatidae em carrapatos das espécies Amblyomma sculptum e Amblyommadubitatum provenientes de capivaras de vida livre do DF, todavia o sequenciamento genéticodas amostras positivas ainda não foi realizado e não é possível dizer qual é a espécie emquestão. Assim, fazem-se necessários novos estudos para elucidar a relação das espécies A.dubitatum e A. sculptum no ciclo de transmissão de agentes da família Trypanosomatidae.
Title: Pesquisa de tripanossomatídeos em carrapatos da região do Distrito Federal
Description:
Tripanossomatídeos são protozoários flagelados pertencentes à família Trypanosomatidae daqual se destacam os gêneros Leishmania e Trypanosoma por apresentarem exemplaresresponsáveis pelo desenvolvimento de doenças tropicais negligenciadas de grandeimportância para a saúde pública.
No Brasil, a Leishmaniose e a Doença de Chagas sãocausadas por protozoários dessa família, Leishmania spp.
e Trypanosoma cruzi,respectivamente, sendo que ambas são transmitidas ao ser humano por insetoshematófagos.
Embora a Leishmania spp.
seja transmitida por flebotomíneos e oTrypanosoma cruzi por triatomíneos, os carrapatos vêm sendo estudados a fim de verificar opossível envolvimento desses artrópodes no ciclo de transmissão de agentes da famíliaTrypanosomatidae, uma vez que também realizam repasto sanguíneo.
Dessa forma, apresente pesquisa teve como objetivo geral verificar a ocorrência de protozoários da famíliaTrypanosomatidae em carrapatos encontrados em capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) devida livre do Distrito Federal (DF) e como objetivos específicos identificar as espécies doscarrapatos coletados e determinar através de métodos moleculares a existência detripanossomatídeos nesses artrópodes.
As amostras de carrapatos utilizadas no presenteestudo foram coletadas a partir de capivaras de vida livre capturadas em áreas recreativas doDF em estudo sanitário prévio realizado entre os anos de 2017 e 2019.
Os carrapatos foramremovidos diretamente do tecido cutâneo das capivaras e submetidos à extração de DNAcom a utilização de isotiocianato de guanidina e fenol clorofórmio.
Para a detecção deagentes da família Trypanosomatidae, as amostras de DNA foram submetidas à cPCRutilizando os oligonucleotídeos D75 (5’- GCA GAT CTT GGT TGG CGT AG -3’) e D76 (5’- CGTTCT CTG TTG CCC CTT TT -3’).
Os produtos de amplificação de todas as reações de cPCRforam separados por eletroforese em gel de agarose 2%, corados em brometo de etídio(Vetec Sigma-Aldrich®, St Louis, MO) e visualizados sob luz ultravioleta (UV transiluminator®,UVP LLC, Upland,32 CA).
Foram amostrados 558 carrapatos provenientes de 57 capivaras,sendo que do número total de carrapatos coletados cerca de 69.
3% foi identificado comoAmblyomma dubitatum, 29% como Amblyomma sculptum e 1.
6% como Amblyomma spp.
Das 229 amostras de DNA testadas para agentes da família Trypanosomatidae, 7 deramresultado positivo após a cPCR, sendo que 5 eram da espécie A.
sculptum (3 fêmeas adultas e2 machos adultos) e 2 eram da espécie A.
dubitatum (1 ninfa e 1 macho adulto).
Osresultados da presente pesquisa evidenciam a presença de agentes da famíliaTrypanosomatidae em carrapatos das espécies Amblyomma sculptum e Amblyommadubitatum provenientes de capivaras de vida livre do DF, todavia o sequenciamento genéticodas amostras positivas ainda não foi realizado e não é possível dizer qual é a espécie emquestão.
Assim, fazem-se necessários novos estudos para elucidar a relação das espécies A.
dubitatum e A.
sculptum no ciclo de transmissão de agentes da família Trypanosomatidae.

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