Desenvolvimiento y validación de métodos bioanalíticos por HPLC- DAD para la cuantificación de fenitoína e inhibidores de la Glicoproteína- P (elacridar y tariquidar) en plasma

Se desarrollaron y validaron dos métodos bioanalíticos simples, rápidos, selectivos y sensibles por HPLC-DAD, uno para la determinación y cuantificación de fenitoina, y otro para inhibidores de la Glicoproteina-P (tariquidar y elacridar) usando 0.2ml de plasma. La separación de los analitos se realizó usando columna Chromolith® Performance RP-18 100 - 4.6 mm, con una fase móvil compuesta de ACN:Buffer acetato 10mM pH=5.2 (27.5:72.5) para fenitoina y suEI, para la determinación de tariquidar, elacridar y su EI se usó ACN:MeOH:Buffer acetato 10mM pH=5.2 (30:50:20), en ambos métodos se usó un flujo de 1mL/min, temperatura de 25±1°C, un complemento de honda de 210nm. Los métodos mostraron ser lineales y sensibles, el método fenitoina en el rango de 100 a 50 000 ng/mL (LC = 36.98 ng/mL, LD = 98.79 ng/ mL) e inhibidores de 100 a 20 000 ng/mL (LC = 36.98 ng/mL, LD = 98.79 ng/mL), también mostraron ser precisos (% CV <15), reproducibles y exactos. La recuperación fue superior al 97% (fenitoina) y 93% (inhibidores) ambos métodos presentaron estabilidad en ciclos de congelamiento y descongelamiento, estabilidad a corto (5h y 24h) y a largo plazo hasta por 3 meses a -20 °C. Los métodos bioanalíticos desarrollados y validados podrán servir para evaluar el efecto sobre la farmacocinética y biodisponibilidad de la coadministración de tariquidar y elacridar con fenitoina.