Etude des mécanismes de formation et des fonctions physiologiques des Actin Bodies chez Saccharomyces cerevisiae

Lors de la transition prolifération/ quiescence chez Saccharomyces cerevisiae, le cytosquelette d’actine est drastiquement remodelé. En prolifération, les cellules assemblent des patches et câbles composé de filaments d’actine très dynamiques. En quiescence, les cellules forment une nouvelle structure cytoplasmique, appelé Actin body (AB), composée d’actine filamenteuse et de plusieurs protéines spécifiques. Surtout, ces AB sont formés de filaments d’actine extrêmement stables.J’ai montré que la formation des AB se déroule en plusieurs étapes. Dès l’entrée en quiescence, les câbles d’actine disparaissent. Si le nombre de structures cytoplasmiques diminue pour tendre vers une à deux structures après 24 heures, leurs intensités augmentent. J’ai démontré que la formation des AB nécessitait la présence de structure d’actine, des « noyaux » préexistant lors de l’entrée en quiescence. Enfin, mes données suggèrent que les nucleateurs d’actines sont rapidement inactivés, mais toujours présent lors de l’entrée en quiescence.Par des approches de suivi de cellules individuelles, j’ai montré que durant les premières heures après l’arrêt de prolifération, les patches vont devenir plus stable et interagir pour former des structures de plus grande taille, permettant à terme la formation d’un ou deux AB. En parallèle de cette réorganisation du cytosquelette d’actine, j’ai montré que les filaments se stabilisent plus tard, lentement, et impliquent Cap1 et Cap2, deux protéines coiffant les extrémités des filaments d’actine. Mes approches supportent aussi l’idée que Svr2 localise de manière asymétrique dans certains patches, les rendant plus stables, et que cela favoriserait la formation optimale des AB.Enfin j’ai étudié la fonction de ces structures. J’ai montré que la présence d’un AB n’était pas essentielle à la survie en quiescence. Par contre, en absence d’AB, les cellules présentent un défaut important de réassemblage des câbles d’actines lors de la sortie de quiescence. Les bases moléculaires restent à être identifier mais ne semble pas directement lié à la stabilité des formines. Je discute du lient qui pourrait exister entre assemblage des câbles, vieillissement chronologique et réorganisation du cytosquelette d’actine.