Étude des anomalies de XPO1 dans les lymphomes B

L'exportine-1 (ou XPO1) joue un rôle clé dans le transport de nombreux ARN et près de 200 protéines cargos. La mutation « hot-spot » XPO1-E571K est présente chez près de 25% des patients atteints par le lymphome primitif du médiastin (PMBL) et la forme classique du lymphome de hodgkin (cHL), et à plus faible fréquence dans la leucémie lymphoïde chronique (LLC) (3%). Des mutations touchant la voie JAK2/STAT6 sont aussi retrouvées dans le PMBL et le cHL. C’est pourquoi nous avons étudié l’implication de XPO1 dans la voie JAK2/STAT6. Nous avons montré que STAT6 est une protéine cargo de XPO1 par les technique immunofluorescence et PLA (Proximity Ligation Assay). Nous avons montré que le traitement au selinexor induit une accumulation nucléaire de STAT6 sauvage et mutée et que STAT6 peut interagir avec les formes mutée et sauvage de XPO1.Afin de rechercher l’impact fonctionnel de la mutation E571K de XPO1 nous avons comparé plusieurs paramètres physiologiques entre les trois lignées de PMBL. Aucune différence n’a été observée. En effet, la présence de l’amplification de l’allèle sauvage dans la lignée présentant la mutation E571K (MedB1) pourrait masquer les éventuels effets de la mutation. De plus, dans la cohorte de patients que nous avons étudiée la mutation n’est jamais retrouvée à l’état homozygote ou hémizygote indiquant l’importance du dosage génique. Nos expériences de CRISPR-Cas9 sur la lignée U2940 dont le gène XPO1 est sauvage ont confirmé notre hypothèse. De manière intéressante, la présence de la mutation E571K modifie l’affinité de XPO1 pour le selinexor. En effet, le KO de l’allèle muté dans la lignée de cHL UH-01 rend les cellules moins sensibles au selinexor. Nous avons conclu que la balance entre l’allèle sauvage et l’allèle muté est un élément clé pour définir les propriétés oncogéniques de XPO1. Dans une étude préliminaire, une étude protéomique dans les lignées PMBL indique que XPO1-E571K est liée à l’importine-β1 ce qui pourrait modifier la localisation subcellulaire de XPO1.Nous avons montré que la localisation cytoplasmique de cycline D1 contrôle le mécanisme d’invasion et de migration dans cellules de lymphome à cellules du manteau (MCL). Cycline D1 étant une protéine cargo de XPO1 nous avons recherché d’éventuelles anomalies de XPO1 dans les lignées de MCL. Aucune anomalie d’expression de localisation ou de fonction de n’a été observée. Il pourrait être intéressant de déterminer la localisation subcellulaire de cycline D1 au moment du diagnostic afin de proposer une meilleure prise en charge pour les patients. De plus, bien que le selinexor soit toujours en essai clinique, son utilisation pour le traitement du MCL pourrait être envisagée dans les cas les plus agressif où cycline D1 est cytoplasmique.