Role of CD31 in neutrophil recruitment and activation during the acute phase of inflammation

Rôle du CD31 dans le recrutement et l’activation des neutrophiles pendant la phase aiguë de l’inflammation Les neutrophiles jouent un rôle central dans la première ligne de défense mise en place contre les agents pathogènes. L’une de leur fonction essentielle est caractérisée par la capacité à rejoindre rapidement la circulation sanguine et de migrer vers les sites inflammatoires, où ils seront activés et exerceront des fonctions effectrices extrêmement puissantes. Ces processus doivent être finement contrôlés afin de moduler leur effet dévastateur dans l'organisme. L'hypothèse de travail de ce travail de thèse est que le CD31, un corécepteur ITIM (Immunoreceptor Tyrosine-based Inhibitory Motif), exprimé de manière constitutive à la surface des neutrophiles, joue un rôle essentiel dans la régulation du recrutement et l'activation des neutrophiles au sein des sites inflammatoires. Nous avons pu mettre en évidence que le CD31 membranaire était clivé lors de l’activation neutrophilaire, et pouvait perdre une grande partie de son domaine extracellulaire, tout en conservant sa portion membranaire. Afin d’étudier le rôle du gain de fonction du CD31 neutrophilaire, nous avons utilisé un peptide synthétique homotypique ayant la capacité de se lier spécifiquement au domaine persistant du CD31 clivé, et permettant le maintien de sa fonction moléculaire. Parallèlement, des souris invalidées pour CD31 ont été utilisées dans divers modèles expérimentaux d'inflammation aiguë afin d’étudier le rôle de sa suppression. Dans leur ensemble, nos données suggèrent que le CD31 joue un rôle complexe et important dans la régulation du recrutement des neutrophiles au sein des sites d'inflammation aiguë. Nous avons pu montrer que des lymphocytes isolés à partir de souris invalidées pour CD31 adhèrent plus fortement aux cellules endothéliales activées, bien que leur progression hors du vaisseau est retardée. A l’inverse, l’ajout du peptide agoniste CD31 diminue leur adhérence, tout en favorisant leur détachement. La littérature rapporte que des neutrophiles isolés à partir de souris déficientes en CD31 sont incapables de migrer hors des vaisseaux, ce qui suggère un rôle important du CD31 dans les processus de transmigration. Cependant, les mécanismes sous-jacents restent inconnus. Nous avons pu montrer qu’au sein du front de migration neutrophilaire, le CD31 empêche l’ouverture des intégrines associées en clusters, par le biais du recrutement de phosphatase. Ce processus abouti à un diminution de l’adhérence neutrophilaires à l'endothélium. A l’inverse, la polarisation du CD31 à l'uropode semble être nécessaire à leur détachement. Cette dernière étape implique la fermeture des intégrines et semble être favorisée par la signalisation CD31. Dans la deuxième partie de ce travail de thèse, nos résultats suggèrent que le CD31 régule également l'activation des neutrophiles au sein des sites inflammatoires. Nous avons tenté de comprendre le rôle du CD31 dans le burst oxydatif et la dégranulation des neutrophiles. SHIP1, une phosphatase impliquée dans la signalisation de CD31, découple l'activation neutrophilaire induite par le récepteur Fc. En utilisant le modèle auto-immun de glomérulonéphrite, nous avons pu montrer que la signalisation du CD31 module les effets délétères causés par les protéases neutrophilaires. Dans ce modèle l’ajout du peptide agoniste CD31 prévient les lésions induites, alors que les souris déficientes en CD31 possèdent des neutrophiles plus activés et des lésions glomérulaires plus importantes. En conclusion, les résultats des expériences effectuées lors de ce travail de thèse suggèrent (1) que CD31 peut moduler le trafic neutrophilaire en contrôlant les intégrines et (2) que CD31 établit un seuil immunologique impliqué dans l'activation des neutrophiles, limitant leur activation excessive pendant la phase aiguë de l'inflammation