RAD52 activity in human homologous recombination

Activité de RAD52 dans la Recombinaison homologue chez l'Homme RAD52 est une protéine impliquée dans les voies de réparation des cassures double-brins (CDBs) de l’ADN. En 2011, est découverte son implication dans une voie de réparation des CDB par recombinaison homologue (RH) chez l’Homme. Toutefois, son activité dans cette voie doit encore être clarifiée.Mon projet de thèse avait pour objectif de déterminer les domaines dans la séquence de RAD52 impliqués dans son activité dans la RH. À cette fin, ce projet comprenait comme expérience clé la complémentation de cellules humaines déficientes en RAD52 et contenant un rapporteur d’activité de la RH, le DR-GFP, avec des variants de RAD52 mutés dans les domaines potentiellement impliqués dans cette activité. L’effet de l’expression de ces variants sur l’activité du DR-GFP était ensuite étudié.Suite à mes essais de complémentation des clones déficients en RAD52, je n’ai pas observé d’effet sur l’activité du DR-GFP, empêchant l’étude des sites de RAD52 impliqués dans la RH en utilisant ces cellules. Toutefois, ces essais m’ont permis de démontrer un effet dominant-négatif de la surexpression de RAD52 sur la RH rapportée par le DRGFP. Cet effet pourrait être la cause de l’incapacité à complémenter les clones déficients en RAD52. J’ai pu exploiter cet effet comme nouvelle approche pour déterminer les sites de RAD52 impliqués dans la RH. Mes résultats suggèrent que RAD52 pourrait être une protéine médiatrice dans la RH, mais également que ses propriétés de recombinaison de l’ADN seraient impliquées dans son activité. Mes travaux apportent des perspectives de recherches sur le spectre d’activité de RAD52 chez l’Homme et sur les facteurs régulant les voies de réparation de l’ADN.Mots clés : RAD52, recombinaison homologue, réparation de l’ADN, cassure double-brin